上海凈信單細胞懸液制備儀之小鼠肝臟單細胞懸液制備的高效解決方案

在細胞生物學、肝臟疾病機制研究等領域，高質量的小鼠肝臟單細胞懸液是開展后續流式分析、單細胞測序、細胞功能實驗的核心前提。傳統手動制備方法常面臨諸多難題：消化酶作用不均導致細胞解離不徹底，反復操作中細胞活性易受溫度影響下降，且人工研磨、過濾步驟繁瑣，難以保證批次間的一致性。這些問題不僅拖慢實驗進度，還可能因樣本質量不穩定影響后續檢測數據的可靠性。而上海凈信單細胞懸液制備儀憑借標準化程序控制、精準溫控及自動化操作，為小鼠肝臟單細胞懸液制備提供了穩定高效的解決方案，有效規避傳統方法的痛點。

實驗目的：小鼠肝臟制備成單細胞懸液，為后續流式細胞分析、單細胞測序、細胞功能檢測等實驗提供高活性、高純度的單細胞樣本，保障實驗數據的準確性與重復性。

實驗選用儀器：

單細胞懸液制備儀 JX-CKSM-4WK-B

實驗步驟：

1、連接儀器電源，打開開關，選好肝臟程序以備用。

2、消化酶和終止液提前用流動自來水解凍，讓其混合更加均勻。

3、小鼠斷頸處死后，取出肝臟部，放入有PBS的培養皿中，放在冰上。

將選取的肝臟組織用PBS洗滌后，用眼科剪剪碎、放入2ml消化管中，加入1ml左右消化酶。

5、放到模塊上，選擇對應程序，點擊運行開始。

6、時間結束后儀器自動停止。

7、用70um濾網過濾，加入終止液終止消化(消化液：終止液=1：1)

過濾后的懸液放到離心機上重懸、重懸后棄掉上清，加入2ml裂紅溶液(200ulFBS)，冰上裂紅(3-5分鐘)，然后加入500ulPBS+1ml碎片去除劑，離心后棄上清，然后洗細胞兩次。

最后加入少量無菌PBS打散混勻底部沉淀細胞，即可得到單細胞懸液。

9、OAPI進行染色，細胞計數儀看結果。

細胞計數儀結果圖

注意事項：

1、單細胞試劑盒要在-20℃低溫保存，使用時提前拿出來用涼水解凍，切記用溫熱水。

2、注意不要清洗單細胞懸液次數或時間太長，導致細胞損失。

3、上海凈信單細胞懸液制備儀讓肝臟樣本處理更省心

從本次小鼠肝臟單細胞懸液制備實驗來看，上海凈信單細胞懸液制備儀的優勢尤為突出。相比傳統手動操作，儀器預設的肝臟專屬程序省去了反復調試參數的麻煩，操作人員只需按步驟放置樣本、啟動程序，即可實現消化酶的精準作用 —— 避免了人工控制消化時間、溫度導致的解離過度或不徹底問題。實驗中，從組織剪碎到儀器自動停止消化僅需常規步驟時長，且全程無需頻繁轉移樣本，最大程度減少了細胞在室溫下暴露的時間，為后續裂紅、清洗步驟保留了更多活細胞。

后續細胞計數儀結果也印證了儀器的可靠性：制備的單細胞懸液活率穩定，細胞分散均勻，無明顯組織碎片殘留，完全滿足 OAPI 染色及后續實驗的要求。尤其值得一提的是，儀器操作門檻低，即使是剛接觸樣本制備的實驗人員，按照流程也能快速上手，有效降低了因操作經驗差異導致的實驗誤差。

對于需要頻繁開展小鼠肝臟相關研究的實驗室來說，上海凈信單細胞懸液制備儀不僅是提升實驗效率的 “好幫手”，更是保障樣本質量穩定性的 “定心丸”。它解決了傳統方法中 “耗時、費力、結果不穩定” 的核心痛點，讓科研人員能將更多精力投入到后續的數據分析與機制探索中，為肝臟領域的研究提供了堅實的樣本制備支持。